Чтение онлайн

Унифицированное определение числа форменных элементов в суточном количестве мочи по методу Каковского – Аддиса

Принцип метода

Подсчет числа форменных элементов (эритроцитов, лейкоцитов, цилиндров) в суточном объеме мочи с помощью счетной камеры.

Специальное оборудование

Микроскоп.

Счетная камера.

Сбор мочи

Классический вариант исследования требует строго соблюдать правила хранения мочи на протяжении длительного времени. Мочу собирают в течение суток: утром больной осво бождает мочевой пузырь, а затем в течение 24 ч собирает мочу в сосуд с несколькими каплями (4–5) формалина или 2–3 кристаллами тимола, желательно хранить мочу в холодильнике. Во избежание получения заниженных данных, обусловленных распадом форменных элементов в нейтральной (щелочной) моче или при низкой ее плотности, надо назначать больным в течение суток, предшествующих исследованию, мясную пищу с ограничением жидкости, чтобы получить мочу кислой реакции и более высокой концентрации. Если нет возможности собрать мочу с учетом описанных условий, то можно собирать мочу 10–12 ч. В этом случае точность результата страдает, но собрать мочу легче. Собирают мочу за ночное время и организуют это следующим образом: в 10 ч вечера больной освобождает мочевой пузырь, мочу выливают, и до 8 ч утра мочеиспускания не должно быть (интервал времени – 10 ч); всю мочу, полученную в 8 ч утра, посылают в лабораторию для исследования. При никтурии такой вариант сбора мочи не подходит.

Ход исследования

Собранную мочу тщательно перемешивают и измеряют ее объем. Для исследования получают осадок из количества мочи, выделенной за 12 мин (1/5 ч), которое рассчитывают по формуле:

Q = V/(t x 5),

где Q – объем мочи, выделенной за 12 мин (мл);

V – объем мочи, собранной за время исследования (мл);

t – время сбора мочи (часы);

5 – коэффициент пересчета за 1/5 ч.

Рассчитанное количество мочи центрифугируют в мерной центрифужной пробирке при 3,5 тыс. оборотов в минуту в течение 3 мин или при 2 тыс. оборотов в минуту в течение 5 мин, отделяют верхний слой, оставляя 0,5 мл мочи с осадком. Если осадок превышает 0,5 мл, то оставляют 1 мл мочи. Осадок тщательно перемешивают и заполняют счетную камеру. Подсчитывают раздельно количество лейкоцитов, эритроцитов, цилиндров и рассчитывают содержание форменных элементов в 1 мкл осадка мочи.

Расчет

Если подсчет проводят в камере Горяева, объем которой равен 0,9 мкл, то количество форменных элементов в 1 мкл определяют по формуле:

X = A / 0,9,

где x – число форменных элементов в 1 мкл;

А – число форменных элементов, подсчитанных во всей камере;

0,9 – объем камеры Горяева (мкл).

Для камеры Фукса – Розенталя, объем которой 3,2 мкл:

X = A / 3,2,

Количество форменных элементов, выделенных с мочой за сутки, рассчитывают по формуле:

В = x х 500 х 5 х 24 = x х 60 000,

если для исследования взять 0,5 мл (500 мкл) из 12-минутной порции мочи, или:

В = x х 1000 х 5 х 24 = x х 120 000,

если осадок был обильным и был оставлен 1 мл (1000 мкл),

где В – число форменных элементов, выделенных за сутки;

X – число форменных элементов в 1 мкл мочи, оставленной для исследования с осадком;

500 или 1 000 – количество мочи (мкл), оставленной с осадком из 12-минутной порции мочи.

Умножение на 5 и 24, дает количество форменных элементов, выведенных с мочой за сутки.

Нормальные величины

У здоровых людей за сутки с мочой выделяется до 2 М лейкоцитов, до 1 М эритроцитов и до 2 К цилиндров.

Примечание . Для более точного подсчета цилиндров необходимо просмотреть не менее четырех камер Горяева и одну камеру Фукса – Розенталя.

Определение количества форменных элементов, выделяемых с мочой за минуту (по методу Амбурже)

Ход определения

Мочу собирают в течение 3 ч, перемешивают, отбирают 10 мл и центрифугируют 5 мин при 2000 оборотов в минуту. Надосадочную жидкость удаляют, оставляя 1 мл с осадком, затем тщательно перемешивают и заполняют счетную камеру. Производят подсчет клеток в 1 мкл осадка мочи по формулам:

X = A / 0,9, или x = A / 3,2,

где Х – число форменных элементов в 1 мкл;

А – число форменных элементов, подсчитанных во всей камере;

0,9 – объем камеры Горяева (мкл);

3,2 – объем камеры Фукса – Розенталя (мкл).

Расчет числа форменных элементов, выделенных за минуту, проводят по формуле:

P = X x (1000 / S) x (V / t),

где Р – число форменных элементов в минутном объеме мочи;

Х – число форменных элементов в 1 мкл осадка;

V – объем мочи, собранной за 3 ч (мл);

S – количество мочи, собранной за 3 ч (мл);

t – время сбора мочи (мин).

Нормальные величины

За минуту с мочой выделяется до 2 x 103 лейкоцитов, 103 эритроцитов.

Клиническое значение

Количественное исследование осадка мочи применяют для диагностики скрытой лейкоцитурии, для выяснения степени гематурии и лейкоцитурии и их преобладания, для динамического наблюдения за ними в процессе лечения и в периоде реконвалесценции.

Исследование осморегулирующей функции почек Исследование основано на способности почек осмотически концентрировать и разводить мочу. Эти процессы зависят от эффективной работы нефронов, общей гемодинамики, определяющей реологию крови, почечного кровотока, нейрогуморальной регуляции и других факторов. Нарушение любого звена приводит к нарушению функции почек.

Проба Зимницкого

Основана на исследовании относительной плотности в отдельных порциях мочи, выделяемых при произвольном мочеиспускании в течение суток в определенном ритме. Исследование проводят при обычном пищевом режиме без ограничения жидкости. Мочу собирают каждые три часа в течение суток и исследуют ее количество, относительную плотность. Общее количество мочи, выделенное в течение суток, составляет 65–75 % выпитой жидкости.

О нормальной функции почек судят по следующим показателям:

1) по превышению дневного диуреза над ночным;

2) по наибольшему колебанию количества и относительной плотности мочи от 1,004 до 1,032 в отдельных ее порциях;

3) по разнице между наиболее высокой и низкой относительной плотностью мочи, которая не должна быть меньше 0,007;

4) по резкому усилению мочеотделения после приема жидкости;

5) по выведению почками не менее 80 % введенной жидкости.

О патологии почек свидетельствуют:

1) монотонность мочеотделения;

2) превышение ночного диуреза над дневным;

3) малая амплитуда колебаний относительной плотности (1,007-1,009-1,010);

4) полиурия.

Нормальный состав мочи

I. Физико-химические свойства

1. Сухой остаток – 55–70 г в сутки.

2. рН – 4,6–8,0 (среднее 6,1).

3. Относительная плотность:

– новорожденные – 1,012;

– младенцы – 1,002-1,006;

– взрослые – 1,003-1,030.

4. Объем (сутки):

– новорожденные – 30–60 мл;

– 10–60 дней – 250–450 мл;

– 60-365 дней – 400–500 мл;

– 1–3 г – 500–600 мл;

– 3–5 лет – 600–700 мл;

– 5–8 лет – 650-1000 мл;

– 8-14 лет – 800-1400 мл;

– взрослые – 600-2500 мл;

– (среднее 1200 мл).

II. Неорганические составляющие (в сутки):

– железо – 0,006-0,1 мг;

– хлориды – 10–15 г;

– натрий – 130,5-261,0 ммоль;

– фосфаты – 0,8–1,3 г;

– сера – 1,6–3,6 г;

– кальций – 2,5–6,25 ммоль.

Органические составляющие (в сутки):

– азот общий – 428,4-1213,7 ммоль;

– аминный – 7,14–30,0 ммоль;

– аммиак – 35,7-71,4 ммоль;

– мочевина – 333–583 ммоль;

– креатинин: у мужчин – 0-305 мкмоль; у женщин – 0-762 мкмоль;

– мочевая кислота – 1,6–3,54 ммоль;

– белок – 10-100 мг.

IV. Клетки, цилиндры (в сутки):

– эритроциты – до 1 х 106;

– лейкоциты – до 1 x 106;

– цилиндры – до 1 x 104.

Изменения мочи при наиболее частых заболеваниях почек, мочевыводящих путей

Пиелонефрит

Пиелонефрит – неспецифический воспалительный процесс с поражением чашечно-лоханочной системы и интерстициальной ткани почек. Пиелонефрит подразделяют на острый и хронический, которые различаются по клиническому течению, но имеют между собой патогенетически обусловленную связь.

Острый пиелонефрит

В начале заболевания нередко единственным изменением мочи является бактериурия, появляющаяся в первые дни болезни, обычно раньше других лабораторных признаков. Через 3–4 дня после начала болезни становится значительной лейкоцитурия – 30–40 лейкоцитов в поле зрения, может быть больше, вплоть до пиурии.

Микрогематурия наблюдается у 3/4 больных, макрогематурия не характерна и бывает обычно в случаях присоединения выраженного цистита. Протеинурия обнаруживается почти всегда, но в большинстве случаев она обусловлена пиурией и не превышает 1 г/л. Значительную протеинурию, гиалиновые и зернистые цилиндры в осадке мочи обнаруживают редко.

Поражение канальцев почек при пиелонефрите приводит к нарушению реабсорбции воды и развитию полиурии. Полиурия сопровождается снижением относительной плотности мочи (гипостенурия).

Пиелонефрит хронический

Хронический пиелонефрит часто имеет латентное течение и может продолжительное время заметно не проявляться. Часто бывают рецидивирующие формы с периодическими обострениями, которые сопровождаются изменениями мочи. После каждого обострения период ремиссии уменьшается по времени. Хронический пиелонефрит всегда заканчивается хронической почечной недостаточностью из-за развития вторично сморщенной почки.

В период обострения наблюдается полиурия с низкой относительной плотностью мочи. Моча бледно окрашена, кислая. При хронизации процесса возрастает потеря белка. Протеинурия достигает 3 г/л. У 5-10 % больных наблюдается макрогематурия. Микрогематурия выявляется у большинства больных. Следует иметь в виду, что гематурия у больных с хроническим пиелонефритом может быть связана с частым наличием у них мочекаменной болезни.

В период обострения отмечаются значительная лейкоцитурия и бактериурия. Имеются наблюдения, что параллельно с ухудшением состояния почек у больных с хроническим пиелонефритом происходит постепенное уменьшение протеинурии и других патологических элементов мочи. Такая динамика изменений мочи может неправильно оцениваться врачами и ошибочно приниматься за показатель улучшения состояния почек.

Гломерулонефрит

Острый гломерулонефрит

Острый гломерулонефрит – острое диффузное заболевание почек, развивающееся на иммунной основе и первично локализующееся в клубочках. Выделяют наличие и выраженность следующих основных синдромов: мочевого, гипертензивного, отечного.

Мочевой синдром

В моче появляются белок, форменные элементы, цилиндры.

Протеинурия обусловлена прохождением макромолекул белка через «поры» стенки клубочкового капилляра, которые под воздействием отложившихся на базальной мембране иммунных комплексов увеличиваются; кроме того, иммунные комплексы могут вызывать локальные изменения капиллярной стенки, повышающие ее проницаемость. Протеинурия не очень высоких степеней, в большинстве случаев она не превышает 1 г/л. Характерны непостоянство и изменчивость степени протеинурии.

Гематурия также может быть различной степени. Нередко выявляются единичные эритроциты в препарате или в поле зрения, суточное выделение эритроцитов по методу Каковского – Аддиса не превышает 5 x 106, но иногда бывает макрогематурия. Количество лейкоцитов в пределах нормы или увеличено (до 20–30 в поле зрения). В осадке мочи определяются цилиндры (чаще гиалиновые), клетки почечного эпителия, причем в количестве от нескольких в поле зрения до значительного. При тяжело протекающем процессе – клетки почечного эпителия с элементами жировой дистрофии.

Гипертонический синдром

Он обусловлен тремя основными механизмами:

1) задержкой Na и воды;

2) активацией ренин-ангиотензин-альдостероновой, а также симпатико-адреналовой систем;

3) снижением функции депрессорной системы почек.

Отечный синдром

Отечный синдром связывают со следующими факторами:

1) снижением клубочковой фильтрации вследствие поражения клубочков, повышением реабсорбции натрия;

2) задержкой воды вследствие задержки в организме натрия;

3) увеличением объема циркулирующей крови;

4) вторичным гиперальдостеронизмом;

5) повышением секреции антидиуретического гормона;

6) повышением проницаемости стенок капилляров, что способствует выходу жидкой части крови в ткани;

7) снижением онкотического давления плазмы при массивной протеинурии.

Развивается олигурия. Относительная плотность мочи обычно высокая, она может быть 1,030-1,032.

Xронический гломерулонефрит

Хронический гломерулонефрит – хроническое диффузное заболевание почек, развивающееся преимущественно на иммунной основе. Характеризуется первичным поражением клубочкового аппарата с последующим вовлечением остальных структур почки и прогрессирующим течением, в результате чего развиваются нефросклероз и почечная недостаточность.

Клинические варианты хронического гломерулонефрита:

1) латентный, проявляется изолированно мочевым синдромом;

2) гематурический, проявляется постоянной гематурией, иногда с эпизодами макрогематурии;

3) гипертонический, проявляется гипертоническим синдромом;

4) нефротический, проявляется нефротический синдром: сочетание упорных отеков с массивной протеинурией (более 3,5 г в сутки);

5) смешанный, характеризуется сочетанием нефротического синдрома и артериальной гипертензии;

6) подострый (злокачественный) быстро прогрессирующий нефрит, характеризующийся сочетанием нефротического синдрома с артериальной гипертензией и быстрым (в течение первых месяцев болезни) появлением почечной недостаточности.

В период обострения выявляются олигурия, снижение относительной плотности мочи, протеинурия (самая выраженная при нефротической форме, более 30 г в сутки), гематурия (количество различное), клетки почечного эпителия с явлениями жировой дегенерации, цилиндрурия.

Кал

Функциональная деятельность кишечника

Кал формируется в толстом кишечнике из непереваренных остатков пищи, секретов, экскретов, слущенного эпителия и клеточного детрита органов желудочно-кишечного тракта и других тканей (кровь, лимфоидная ткань и др.) и микрофлоры кишечника. При обычном питании у здорового человека кал содержит 75–80 % воды и 20–25 % плотного (сухого) остатка. У здорового человека состав каловых масс зависит от режима питания и состава пищи.

При обычном пищевом рационе состав и характер кала определяется состоянием пищеварительной системы: механическое измельчение пищевых продуктов в ротовой полости, секреторная функция пищеварительных желез, выраженность ферментативного расщепления, степень всасывания продуктов гидролиза, перистальтика кишечника, особенности кишечного микробного пейзажа и т. д. Клиническое исследование кала позволяет оценить функциональное состояние органов пищеварения, а также помогает при диагностике инвазий кишечными паразитами, язвенных, воспалительных и деструктивных процессов, кишечных инфекций и пр.

Клинический анализ кала Клинический анализ кала включает определение физико-химических свойств и микроскопическое исследование. Для получения достоверного результата копрологического исследования необходимо строго соблюдать правила подготовки обследуемого, правила сбора, хранения и доставки исследуемого материала.

Подготовка больного

Исследование кала для выявления патологических состояний желудочно-кишечного тракта (кровотечения, распадающиеся опухоли, глистные инвазии, туберкулез кишечника и т. п.) не требует специальной подготовки больного.

Для оценки функционального состояния органов желудочно-кишечного тракта (секреторная и переваривающая функции желудка, секреторная функция печени и поджелудочной железы, всасывающая и моторная функции кишечника, состояние микробного пейзажа кишечника и т. п.) необходимо соблюдение пациентом перед обследованием в течение 3–5 дней одной из следующих сбалансированных диет, содержащих определенный набор продуктов в соответствующем соотношении:

1) диета Шмидта включает 1–1,5 л молока, 2–3 яйца всмятку, 125 г слабопрожаренного рубленого мяса, 200–250 г картофельного пюре, слизистый отвар (40 г овсяной крупы), 100 г белого хлеба или сухарей, 50 г масла. Общая калорийность – 2250 кал. Данная диета является щадящей. При нормальном функционировании всех отделов пищеварительного тракта пищевые остатки в кале при микроскопическом исследовании не обнаруживаются;

2) диета Певзнера включает 200 г черного и 200 г белого хлеба, 250 г мяса, жаренного куском, 100 г масла, 40 г сахара, гречневую и рисовую каши, жареный картофель, овощи (морковь, салат, квашеную капусту), компот из сухофруктов, свежие яблоки. Калорийность до 3250 кал. Данная диета основана на принципе максимальной пищевой нагрузки на пищеварительную систему здорового человека. При микроскопическом исследовании в кале здорового человека обнаруживается большое количество неперевариваемой клетчатки и незначительное количество мышечных волокон. Диета Певзнера дает большую нагрузку пищеварительной системе и позволяет выявить даже незначительную степень недостаточности процессов пищеварения. Диетой Певзнера удобно пользоваться в поликлинических условиях, так как она наиболее полно соответствует обычному пищевому рациону здорового человека.

При запорах длительность нахождения на диете увеличивается до 5–7 дней, при склонности к диарее – сокращается до 1–2 дней. Копрологическое исследование проводят при 3, 4, 5-й дефекациях. Трехкратное исследование фекалий дает наиболее точное представление о функциональном состоянии пищеварительного тракта. Не допускается направлять кал на исследование с целью определения функционального состояния пищеварительной системы после клизмы, приема медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (препараты белладонны, пилокарпин, слабительные средства, закрепляющие средства и т. п.), изменяющих окраску кала (препараты железа, висмута, бария и т. п.), после введения ректальных свечей, приема внутрь касторового или вазелинового масел.

При подготовке больного для обследования на скрытое кровотечение необходимо исключить из рациона питания на 3–4 дня мясо, рыбу, все виды зеленых овощей, яйца весенней кладки, препараты железа.

Правила сбора материала для исследования

Для исследования направляют свежевыделенный кал в количестве, полученном за одну дефекацию. Материал не должен содержать посторонних примесей (моча, выделения половых органов и т. п.). Кал собирают в чистую широкогорлую стеклянную посуду с крышкой и сразу доставляют в лабораторию. В тех случаях, когда требуется количественный химический анализ (определение количества жира, аммиака и др.), кал следует собирать в предварительно взвешенную посуду и взвешивать его сразу после выделения (при стоянии испаряется вода, что приводит к изменению веса материала). Если нет возможности для немедленного проведения копрологического анализа, то во избежание изменений под действием ферментов и микрофлоры материал хранится до исследования в холодильнике не более 10–12 ч от момента дефекации.

Для бактериологического и паразитологического исследований используют только свежевыделенный кал.

Допустимо консервирование (жидкость Шеляпиной: водный 5 %-ный раствор формалина и глицерина) материала для проведения исследований кала на яйца гельминтов.

Физические свойства

При исследовании физических свойств оценивают количество, консистенцию, форму, цвет и запах каловых масс. Исследуют макроскопически видимые примеси.

Количество выделяемого за сутки кала зависит от состава и количества принятой накануне пищи, может колебаться в значительных пределах.

При обычном рационе, по составу приближающемуся к пробным диетам, суточное количество кала составляет 120–200 г. Количество кала сокращается при преобладании в рационе животных белков и увеличивается при преимущественно растительной диете. Увеличение суточного количества кала (полифекалия) возникает при нарушениях функционального состояния желудочно-кишечного тракта: нарушении всасывания, желчеотделения (ахилия), поражении поджелудочной железы, при энтеритах и пр.

Уменьшение суточного количества кала развивается при хронических запорах.

Консистенция и форма зависят от процентного содержания воды. В норме кал оформленный, имеет колбасовидную форму, содержит 75–80 % воды. При увеличении процентного содержания воды вследствие усиления перистальтики кишечника (недостаточное всасывание воды), обильном выделении стенкой кишечника воспалительного экссудата и слизи кал становится неоформленным, кашицеобразным или жидким. Жидкий кал содержит до 90–95 % воды. При постоянных запорах вследствие избыточного всасывания воды кал становится плотным и может иметь вид небольших шариков – «овечий кал». При стенозе или спастическом сужении нижнего отдела сигмовидной или прямой кишки могут наблюдаться особые формы кала: «лентовидная форма», «форма карандаша».

Цвет кала у здорового человека обусловлен наличием стеркобилина и мезобилифусцина, которые образуются из билирубина желчи под влиянием кишечной микрофлоры и придают ему различные оттенки коричневого цвета. Однако цвет фекальных масс, помимо стеркобилина, определяется целым рядом факторов, таких как характер и состав пищи, наличие пищевых пигментов, прием различных лекарственных средств, наличие патологических примесей (табл. 24).

Таблица 24. Изменение окраски кала в зависимости от различных условий

Запах в норме неприятный, но не резкий и обусловлен преимущественно скатолом, индолом и в меньшей степени – фенолом, ортои паракрезолами. Эти органические соединения ароматического ряда образуются при распаде белков. Запах усиливается при преобладании в рационе продуктов, богатых белками, при поносах, при гнилостной диспепсии. Запах ослабевает при преимущественно растительной и молочной диете, при запорах, при голодании. При бродильной диспепсии кал приобретает кислый запах. В анализе запах кала указывают в том случае, если он резко отличается от обычного.

Макроскопически видимые примеси в кале могут быть представлены непереваренными остатками пищи, слизью, кровью, гноем, конкрементами, паразитами. В норме непереваренные остатки пищи в кале макроскопически не обнаруживаются. Выраженная недостаточность желудочного и панкреатического переваривания сопровождается выделением комков непереваренной пищи – лиенторея.

Наличие непереваренных остатков мясной пищи – креаторея. Значительное содержание в кале жира – стеаторея. Слизь в избыточном количестве обнаруживается макроскопически в виде тяжей, хлопьев, плотных образований и указывает на воспаление слизистой оболочки кишечника. Примесь крови в значительных количествах изменяет цвет кала, при незначительных кровотечениях примесь крови определяется при химическом исследовании.

Гной обнаруживается при язвенных процессах преимущественно в нижних отделах кишечника. Конкременты каловых масс по происхождению могут быть желчными, панкреатическими или кишечными (копролиты).

Желчные камни бывают холестериновыми, известковыми, билирубиновыми, смешанными, обнаруживаются, как правило, после приступа печеночной колики.

Панкреатические камни состоят из карбоната или фосфата извести, имеют малую величину и неровную поверхность.

Копролиты – образования темно-коричневого цвета, состоят из органического ядра и наслоившихся минеральных солей (фосфаты), непереваренных остатков пищи, труднорастворимых лекарств и т. п. Выделяют ложные копролиты – уплотнившиеся в области перегибов толстой кишки каловые массы. Ложные копролиты могут достигать особо крупных размеров.

Паразиты могут быть обнаружены невооруженным глазом в виде целых особей (аскариды, власоглав, острицы), а также их фрагментов: сколексы и членики (свиной и бычий цепни, широкий лентец).

Химические свойства

При химическом исследовании кала определяют его реакцию (рН), наличие крови, стеркобилина, билирубина, а также других химических компонентов. Реакцию (рН) кала определяют при помощи универсальной лакмусовой бумаги для измерения рН от 1,0 до 10,0. Предварительно смочив дистиллированной водой, лакмусовую бумагу прикладывают к нескольким местам поверхности свежих испражнений. Результат учитывают через 2–3 мин, сравнивая развившуюся окраску поверхности лакмусовой бумаги с контрольной шкалой. Нормальное значение рН кала 6,0–8,0.

Реакция кала преимущественно зависит от жизнедеятельности микрофлоры кишечника. При преобладании белковой пищи и активации бактерий, расщепляющих белок, образуется много аммиака, придающего калу щелочную реакцию. При углеводной диете и активации бродильной микрофлоры усиливается образование СО2 и органических кислот, дающих кислую реакцию.

Активация бродильной флоры связана с усилением перистальтики толстой кишки, что лежит в основе развития бродильной диспепсии при энтеритах. Процессы гниения усиливаются при разложении белков, выделяемых кишечной стенкой (клетки, воспалительный экссудат). Таким образом, гнилостная диспепсия чаще развивается при колитах.

Наличие крови в кале свидетельствует о патологических процессах в желудочно-кишечном тракте, сопровождающихся изъязвлением слизистой или распадом опухоли. Наиболее часто для обнаружения скрытой крови используют бензидиновую и амидопириновую пробы. Сущность этих проб состоит в том, что в кал добавляют вещество, легко отдающее кислород при взаимодействии с кровью, и вещество, изменяющее свой цвет при взаимодействии с выделяющимся кислородом.

Экспресс-метод. Сухой реактив (ортотоледин – 1 часть, виннокаменная кислота – 1 часть, перекись бария – 1 часть, ацетат кальция – 20 весовых частей) в количестве 0,3 г (на кончике ножа) помещают на белую фильтровальную бумагу и смачивают 2–3 каплями каловой эмульсии. Обнаружение через 2 мин синего окрашивания реактива и голубого ореола вокруг порошка расценивается как положительный результат пробы. Проба обладает высокой чувствительностью, обнаруживает 4000–4500 эритроцитов в 1 мл (3–5 эритроцитов в поле зрения).

Бензидиновая проба. На предметное стекло наносят кал толстым слоем, добавляют 2–3 капли раствора бензидина в уксусной кислоте (реактив готовят ex tempore: немного бензидина на кончике ножа растворяют в 5 мл ледяной уксусной кислоты или в 50 %-ном растворе ее) и столько же 3 %-ной перекиси водорода. Перемешивают стеклянной палочкой. При положительной реакции на кровь появляется сине-зеленое окрашивание в течение 2 мин. Окрашивание, появившееся после 2 мин, не учитывается. Проба с бензидином чрезвычайно чувствительна – выявляет незначительное содержание крови (0,2 %) в кале.

Амидопириновая проба. Кал разводят водой приблизительно в 10 раз. К 4 мл приготовленной эмульсии прибавляют 4 мл 5 %-ного спиртового раствора амидопирина и по 10–12 капель 30 %-ного раствора уксусной кислоты и перекиси водорода. При наличии в кале крови появляется лиловое окрашивание. Проба с амидопирином менее чувствительна и выявляет более значительное кровотечение.

В настоящее время различными фирмами предлагаются различные тест-полоски для выявления скрытой крови в кале, основанные как на химических реакциях, так и на иммунохроматографических. Последние являются наиболее специфичными, так как определяют гемоглобин при помощи моноклональных антител.

Стеркобилин образуется спонтанно из стеркобилиногена (уробилиногена) под действием света и кислорода воздуха. У здорового человека с калом выводится от 250 до 320 мг стеркобилина в сутки. Стеркобилин – основной пигмент кала, который придает ему определенную окраску. При отсутствии стеркобилина кал обесцвечивается (цвет глины). Реакцию на стеркобилин ставят при появлении у больного неокрашенного кала. Стеркобилин определяют методом с двухлористой ртутью – сулемой (проба Шмидта). 7 г сулемы растворяют в 100 мл дистиллированной воды при нагревании. После охлаждения фильтруют через бумажный фильтр (насыщенный раствор). Небольшое количество кала растирают в ступке с 3–4 мл реактива до консистенции жидкой кашицы, переливают в чашку Петри и оставляют стоять до следующего дня. В присутствии стеркобилина кал приобретает розовое окрашивание, интенсивность которого зависит от содержания пигмента.

При наличии в кале неизмененного билирубина окраска бывает зеленой за счет образования биливердина. Билирубин, попадающий в кишечник с желчью, под действием бактериальной флоры толстого кишечника полностью восстанавливается в стеркобилиноген и стеркобилин. В кале неизмененный билирубин появляется при ускоренной перистальтике. Билирубин может также появляться при дисбактериозе кишечника (после массовой антибиотикотерапии). Билирубин выявляют реактивом Фуше: 25 г трихлоруксусной кислоты, 100 мл дистиллированной воды и 10 мл 10 %-го раствора хлорида железа. Ход исследования: кал растирают с водой в соотношении 1: 20 и прибавляют по каплям реактив Фуше (но не больше объема разведенного кала). При наличии билирубина появляется зеленое или синее окрашивание.